Comment faire de la gélose nutritive à la maison

Les scientifiques et les chercheurs étudient la croissance bactérienne par la préparation des cultures en laboratoire. Boîtes de Pétri contenant de la gélose nutritive poussent des cultures bactériennes à partir d'un seul coup ou inoculation. Les étudiants peuvent préparer gélose nutritive à la maison en utilisant des fournitures dans des épiceries ou les magasins d'aliments santé pour un projet d'expo-sciences. Appareils de cuisine classiques et ustensiles de base fournissent les outils pour préparer un milieu de culture stérile qui peut être distribuée dans des boîtes de Pétri. Suite à des techniques stériles en chauffant les matériaux et de garder les surfaces propres et sèches permettra d'améliorer les résultats en empêchant la moisissure et les particules de contaminer la culture.


Sommaire

  • Instructions
  • Conseils & avertissements
  • Choses que vous devez

    • Les filtres à café
    • Passoire
    • 2 grands bols clairs
    • 16 oz bouillon de bœuf sans gras
    • 16 oz eau distillée



    • Marmite avec couvercle
    • Poêle
    • 10 grammes d'agar agar




    • Cuillère-mesure
    • Agitateur
    • Rouleau de serviettes en papier



    • Maniques
    • poche de métal
    • Des boîtes de Pétri stériles ou ramequins claires avec des couvercles
    • Facultatif: minuterie, dessous de plat, four, poêle, une feuille d'aluminium, poêle

    Instructions

    1. Placez un filtre à café dans une passoire et accrocher la crépine sur l'ouverture de la cuvette claire.

    2. Verser lentement le bouillon dans le filtre, faire en sorte que le bouillon ne déborde pas sur les côtés du filtre. Si le filtre est bouché par des particules, enlever le filtre utilisé, le remplacer par un filtre propre et continuer à verser le bouillon.

    3. Retirer la crépine et le filtre à partir du haut de la cuve et observer si le bouillon semble clair (ie, il n'y a pas de particules en suspension dans le liquide). Si les particules flottent dans le liquide, répétez les étapes 1 et 2 en utilisant un second bol transparent et un filtre de café frais.

    4. Placez le pot sur le poêle et versez le bouillon clair dans le pot.

    5. Ajouter 16 onces d'eau distillée pour le pot contenant le bouillon.

    6. Mettez sur le feu et régler le feu à moyen-bas. Chauffer le bouillon à ébullition (ie, de petites bulles apparaissent près du côté du pot).

    7. Ajouter 1 cuillère à café de la poudre d'agar-agar dans le bouillon frémissant (environ 2,5 grammes) et agiter le mélange jusqu'à ce que la poudre soit dissoute. Assurez-vous de remuer la poudre à se dissoudre et empêcher la gélatine de couler au fond de la casserole (où il peut brûler).

    8. Répétez l'étape 7 jusqu'à ce que toute la poudre d'agar-agar a été dissous dans le bouillon.

    9. Continuer à mélanger le bouillon pendant environ 1 minute pour veiller à ce que toute la poudre soit complètement dissoute.

    10. Éteignez le poêle, placez le couvercle sur la marmite et laisser refroidir le liquide pendant au moins 15 minutes.

    11. Disposer les boîtes de Pétri stériles dans une rangée pour un assemblage facile, mais ne supprime pas le lids.If désiré, placer un trépied pour tenir le pot chaud. Si vous utilisez à couvercle ramequins au lieu de boîtes de Pétri, stériliser les ramequins en plaçant les tasses et couvercles inversées (tête en bas) sur une feuille et cuire biscuit recouvert de papier aluminium dans le four pendant au moins une heure à 375 degrés Fahrenheit. Assurez-vous que les tasses et couvercles stérilisés sont complètement refroidis avant de les utiliser.

    12. Prudemment, toucher l'extérieur du pot pour vérifier qu'il est chaud au toucher et placez le pot sur le trépied. Si le pot est trop chaude au toucher, attendez au moins 10 minutes pour laisser le pot cool.

    13. Retirer le couvercle et mettre de côté. Placez la louche dans la marmite.

    14. Retirez le couvercle d'une boîte de Pétri et distribuer un bouillon de culture pour remplir le plat à mi-chemin. Couvrir le plat immédiatement avec son couvercle.

    15. Répétez l'étape 14 pour chacune des boîtes de Pétri.

    16. Laisser le bouillon nutritif se solidifier dans les boîtes de Pétri pendant au moins 1 heure, non perturbée.

    17. Secouer doucement du côté des boîtes de Pétri à l'autre pour vérifier que le bouillon nutritif a complètement solidifié. Si le bouillon est pas complètement gélifié, attendre encore 20 minutes avant de vérifier à nouveau.

    18. Couvrir une table ou une surface plane avec un rouleau de serviettes en papier pour créer une zone de travail stérile. Déchirez une feuille de papier absorbant et le plier à quatre reprises pour créer une épaisse liasse, rectangulaire. Réglez cette liasse sur une extrémité de la zone de travail.

    19. Transférer une boîte de Pétri à la zone de travail stérile et enlever le couvercle. Retourner délicatement le plat et placez une extrémité sur le côté de la bourre plié, de sorte qu'il se trouve inversé et légèrement incliné (avec un léger écart par la serviette en papier wad).

    20. Tournez le couvercle et placez-le au-dessus de la boîte de Pétri sur la surface de travail stérile. Si des gouttes d'eau apparaissent sur le couvercle, secouez doucement cette humidité avant de placer sur la surface couverte, mais ne touchez pas l'intérieur du couvercle.

    21. Répétez les étapes 19 et 20 pour chaque boîte de Pétri, positionner un côté du plat inversé sur le côté de la boîte précédente plutôt que de la bourre de serviette en papier. Les plats vont apparaître comme un ensemble en quinconce, avec des écarts d'un côté de sorte que l'excès d'humidité peut s'évaporer.

    22. Regardez les boîtes de Pétri inversées pour vérifier si l'humidité sur les côtés des plaques évaporé. Une fois que toute l'humidité a autorisé, tourner les plaques à droite; l'autre et couvrir immédiatement avec les couvercles d'utilisation.

    23. Ensemencer la gélose nutritive sur la plaque d'essuyage par un tampon contenant de la culture désirée sur la surface de la gélose nutritive avant de recouvrir avec le couvercle. Tournez la boîte de Pétri sur de telle sorte que le solide est sur le dessus. Rangez la boîte de Pétri inoculées avec le solide sur le dessus pour la culture et le couvercle sur le fond pour attraper toute humidité, particules libres ou de la croissance.

    Conseils & Avertissements

    • Si l'humidité excessive apparaît sur les couvercles, secs et stériliser les couvercles dans l'ensemble au four à 375 degrés Fahrenheit pendant au moins 1 heure (assurez-vous de placer les couvercles dans une casserole propre recouverte de papier d'aluminium avant de les placer dans le four).
    • Soyez prudent lorsque vous manipulez le pot chaude pour éviter les brûlures. Si le côté du pot est trop chaude, le liquide dans le pot est très chaud. Le bouillon de culture doit être chaud pour distribuer dans les plats, mais pas trop chaud pour produire une condensation excessive dans les boîtes de Pétri pendant le refroidissement et le réglage.
    • Ne touchez pas l'intérieur de la boîte de Pétri (ie, une plaque ou couvercle) pour éviter d'introduire des bactéries indésirables dans la culture.
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